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2019-nCoV分子診断キット（蛍光PCR検査）

【使用目的】

このキットは、喉の 2019-nCoV のORF1abおよびN遺伝子核酸を定性的に検出するための TaqMan プローブリアルタイム蛍光 PCR です。

呼吸器感染症の症状がある患者および濃厚接触者の綿棒、唾液。検査結果は臨床上の参考のみを目的としており、検査結果として使用することはできません。

事件を確認または排除するための根拠。オペレーターは、遺伝子増幅または分子生物学的手法のテストに関する専門トレーニングの経験があり、実験室業務に関連する資格を持っている必要があります。実験室には、合理的な生物学的安全対策と保護手順が必要です。

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製品の詳細

【試験原理】

このキットでは、リアルタイム蛍光 PCR 技術のプライマーとプローブが、2019-nCoV の ORF1ab 遺伝子と N 遺伝子の保存領域と特異的領域にそれぞれ設計されています。PCR 増幅中、プローブはテンプレートに結合し、プローブの 5' 末端レポーターグループが Taq 酵素 (5'→3' エキソヌクレアーゼ活性) によって切断され、それによって消光グループから離れて蛍光シグナルを生成します。。検出された蛍光シグナルに基づいてリアルタイム増幅曲線が自動的にプロットされ、サンプルのCt値が計算されます。FAM および HEX 蛍光色素はORF1ab遺伝子とNに標識されています2019-nCoV-PCR 反応溶液中の遺伝子プローブ。1 つの検査で、2019-nCoV の上記 2 つの遺伝子の定性的検出を同時に行うことができます。キットには、ROX 蛍光基で標識されたヒトハウスキーピング遺伝子断片である内部コントロール (IC) が付属しています。

注: 異なるロットのコンポーネントの交換はできません。

【保存条件と賞味期限】

キットは室温で輸送されます。

長期保存するには、キットを次の温度の暗所に保管する必要があります。

-25℃～-15℃で12ヶ月有効です。

製造日と使用期限 (ラベルを参照)。

【サンプル要件】

対象サンプル鼻咽頭スワブ
サンプル収集鼻咽頭スワブ: 鼻咽頭分泌物を滅菌スワブで拭き取り、保存溶液を含むチューブに入れた。
サンプルの取り扱いと保存: 核酸検出に使用されるサンプルは、できるだけ早く検査されるものとします。24時間以内に検査できる場合は2～8℃で保存可能です。サンプルは-70℃以下で保存してください（-70℃の保存条件がない場合は、-20℃で一時保存します）。サンプルの輸送中は凍結と融解を繰り返すことは避けてください。
【試験方法】
核酸抽出
1.1 手動核酸抽出ネガティブコントロール、同量のサンプル核酸抽出および精製試薬をチューブに追加します (抽出の場合、サンプルと核酸抽出および精製試薬は 1:1)。核酸増幅のための PCR 反応。

1.2 核酸の機械抽出:
このキットは他の市販キットと互換性があります。その他の市販の核酸抽出キットについては、説明書に従ってください。

システムの準備とロード

2019-nCoV-PCR Reaction Solution と RT-PCR Enzyme Mix の使用開始時に、再水和物（滅菌精製水）をそれぞれ 1250 μL/チューブ、250 μL/チューブ加えて溶解します。これは、20秒間ボルテックスし、その後軽く回転させることによって行われます。 2019-nCoV-RT-PCR混合物の調製：n×25μLの2019-nCoV-PCR反応溶液とn×5μLの酵素混合物を採取します（nは反応液の数です）反応チューブ）、混合し、遠心分離します。そして、各チューブを蛍光ＰＣＲ装置に適したＰＣＲチューブに３０μＬずつ分注した。20μLのNegative Control、抽出したサンプル核酸および2019-nCoV-PCR Positive Controlを反応系に加え、総反応量は50μLとなります。チューブのカバーを締め、数秒間のボルテックスミックスと遠心分離の後、チューブを増幅テストエリアに移動します。